MicroRNA-31对 HIV感染者CD4+ T细胞CD69表达的影响及机制

吕俊楠; 陈亚利; 宋成博; 傅雅静; 姜拥军; 张子宁

文章摘要

MicroRNA-31对 HIV感染者CD4+ T细胞CD69表达的影响及机制

Effect and mechanism of microRNA-31 on CD69 expression on CD4+ T cells of HIV-infected patients

DOI：10.3969/j.issn.1007-8134.2020.06.003

中文关键词: HIV miR-31 CD69 CD4+ T细胞早期免疫活化 KSR2 DUSP7

英文关键词: HIV miR-31 CD69 CD4+ T cell early immune activation KSR2 DUSP7

基金项目:国家“十二五”科技重大专项（2015ZX10004801-002）；国家自然科学基金（81371884）

作者	单位
吕俊楠	国家卫生健康委员会艾滋病免疫学重点实验室、国家医学检验临床医学研究中心、中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所
陈亚利	国家卫生健康委员会艾滋病免疫学重点实验室、国家医学检验临床医学研究中心、中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所
宋成博	国家卫生健康委员会艾滋病免疫学重点实验室、国家医学检验临床医学研究中心、中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所
傅雅静	国家卫生健康委员会艾滋病免疫学重点实验室、国家医学检验临床医学研究中心、中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所
姜拥军	国家卫生健康委员会艾滋病免疫学重点实验室、国家医学检验临床医学研究中心、中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所
张子宁	国家卫生健康委员会艾滋病免疫学重点实验室、国家医学检验临床医学研究中心、中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所

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中文摘要:

目的　探讨微小RNA（microRNA, miR）-31对HIV感染者CD4+ T细胞表面CD69表达的影响及作用机制。方法　通过流式细胞仪分析健康对照与HIV感染者的CD4+ T细胞活化后CD69表达情况。在健康人外周血单个核细胞中转染antagomir-miR-31抑制miR-31表达，观察CD4+ T细胞活化后CD69表达情况。采用生物信息学方法预测miR-31靶基因及相关通路，并在293T细胞系中过表达和抑制miR-31，通过实时荧光定量PCR检测相关靶基因的表达。结果　与健康对照相比，HIV感染者CD4+ T细胞在抗-CD3/CD28抗体刺激活化后CD69表达更低。抑制miR-31表达后，CD4+ T细胞活化时CD69的表达与对照相比显著下降。miR-31低表达后T细胞活化信号通路KSR2和DUSP7表达升高。结论　miR-31可以有效调节CD4+ T细胞表面CD69的表达，对HIV感染者早期免疫活化起重要作用。

英文摘要:

Objective　To explore the effect and mechanism of microRNA-31 (miR-31) on CD69 expression on CD4+ T cells in HIV-infected patients. Methods　CD69 expression on stimulated CD4+ T cells from healthy controls and HIV-infected patients was analyzed by flow cytometry. When peripheral blood mononuclear cells from healthy controls were transfected with antagomir-miR-31 to inhibit miR-31 expression, CD69 expression on CD4+ T cells after stimulation was observed. The target gene of miR-31 and related pathway were predicted by bioinformatics method and the expression of related target gene was verified by overexpression and inhibition of miR-31 in 293T cell line based on quantitative real-time PCR. Results　Compared with healthy controls, CD69 expression on CD4+ T cells from HIV-infected patients was significantly lower after anti-CD3/CD28 antibody stimulation. CD69 expression on CD4+ T cells was significantly decreased when miR-31 expression was inhibited, compared with controls. The expression of KSR2 and DUSP7 in T cell activation signal pathway was increased upon the low expression of miR-31. Conclusions　miR-31 can effectively regulate CD69 expression on surface of CD4+ T cells and plays an important role in early immune activation in HIV-infected individuals.

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